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传统ADC由单克隆抗体、连接子和细胞毒性载荷组成，其作用机制分为靶向结合、内化、溶酶体释放及载荷活性发挥四个阶段。抗体通过抗原结合内化后，ADC进入溶酶体，连接子通过酸水解、二硫键还原或酶切（如肽链断裂）释放载荷。释放的细胞毒性分子需稳定穿过溶酶体膜并扩散至作用靶点，部分还可通过“旁观者效应”杀伤邻近细胞。ADC设计中，连接子需在血液循环中稳定，仅在靶细胞内激活。此外，DAR值（抗体载药量）显著影响ADC的体内性能：高DAR（如DAR8）可能因疏水性引发聚集或加速清除，但可通过极性连接子或前药设计优化。近年来，位点特异性偶联技术（如工程化半胱氨酸或非天然氨基酸）提高了ADC的均一性，为DAC设计提供了技术参考。
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